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SureSeq Myeloid MRD NGS Panel

SureSeq™ NGS MRD Panel – Hochsensitives NGS-Panel zur MRD-Analyse bei AML 

Das SureSeqTM Myeloid MRD-Panel wurde in Zusammenarbeit mit führenden Krebsexpertinnen und -experten und in Übereinstimmung mit den Empfehlungen des European LeukemiaNet (ELN) [1, 2] entwickelt, um einen kostengünstigen NGS-Assay zur Untersuchung der MRD in AML-Proben anzubieten. Der Inhalt des Panels umfasst Schlüsselgene für die Beurteilung der AML, einschließlich Genen, die bei MPN und MDS eine Rolle spielen, um die sekundäre AML-Progression zu untersuchen. 

Darüber hinaus sind Gene enthalten, die bei der Erforschung des möglichen Ansprechens auf Medikamente eine Bedeutung haben, um eine umfassende und informative Probenanalyse zu ermöglichen.  

Intelligentes Panel-Design mit hoher Abdeckungstiefe 

Durch das intelligenten Panel-Design von SureSeq übertrifft das Myeloid-MRD-Panel die typische Empfindlichkeit alternativer NGS-Panels, um SNVs, Indels und interne Tandemduplikationen (ITDs) bis auf 0,05 % VAF genau zu erkennen.

Zielgene 

Gene

Exons

CSF3R

Exons 13–17

MPL

Exon 10

SF3B1 Exons 13–16

IDH1

Exon 4

KIT

Exons 2, 8–11, 13 und 17

NPM1

Exon 11

JAK2

Exons 12 und 14

FLT3 Exons 13–15 und 20
IDH2 Exons 4 und 5
TP53 Exons 2–11 (inc. NM_001276695:ex10, NM_001276696:ex10)
CALR Exon 9
Exon 9 Exons 4–8
CEBPA Exon 1
Weitere Details

Abbildung 1: CALR Exon 9 (hg19 chr19:13054527-13055304); Tiefe der Abdeckung pro Base (grau); Zielregion (grün); genkodierender Bereich gemäß RefSeq (blau); GC-Anteil (rot). 

Abbildung 2: IGV-Plot, der eine hohe Einheitlichkeit der Abdeckung aller Zielregionen im Panel zeigt, einschließlich NPM1 Exon 11. 

Abbildung 3: FLT3-ITDs unterschiedlicher Größe und sogar Regionen mit mehreren ITDs können sicher erkannt werden. ITD-Größen sind [A] 174 bp, [B] 225 bp, [C] 195 bp mit zusätzlichen 6 bp, [D] 120 bp, [E] 168 bp mit zusätzlichen 69 bp.

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Referenzen 

[1] European LeukemiaNET. Verfügbar auf: www.leukemia-net.org

[2] Döhner et al Blood. 2022; 140(12):1345-1377. 

Haftungsausschluss 

SureSeqTM: Nur für Forschungszwecke, nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren.  

Hersteller und Trademark: SureSeqTM (Oxford Gene Technology IP Limited) 

Spezifikationen
Anzahl Targets  45 Hotspot-Exons von 13 Genen   
Panel-Größe  11,2 kb  
Mittlere Zielabdeckung  Bis zu 20.000 x   
Nachweisgrenze SNVs, Indels, ITDs  0,05 % 0,1%
Empfohlener DNA-Input  11,2 kB  200 ng
  Proben pro Lauf   
NextSeq 500 High Output 16 24
NextSeq 2000 P3 48 72
NovaSeq SP 32 48
NovaSeq S1 64 96

 

Erkennung von SNVs, Indels und einer ITD, mit erwarteten Häufigkeitsbereichen von 0,1 %–0,05 %. SNVs werden gefiltert, um UMIs (Unique Molecular Identifiers) mit einer Lesegruppengröße von 1 zu entfernen. Myeloischer Referenz-DNA-Standard (Horizon Discovery), sequenziert auf einem Illumina NextSeq® 500. 

  Gen Variante Koordinate 0,1% VAF 0,1% VAF 0,05% VAF 0,05% VAF Neg. Ktrl Neg. ctrl
        Lesetiefe  Beobacht. VAF Lesetiefe  Beobacht. VAF Lesetiefe  Beobacht. VAF
SNV SF3B1 c.2219G>A chr2:197401989 7426 0,13 14282 0,03 15076 0
  IDH1 c.394C>T chr2:208248389 6743 0,09 15572 0,06 15734 0
  JAK2 c.1849G>T chr9:5073770 10408 0,12 22348 0,08 22065 0
  FLT3 c.2503G>T chr13:28018505 9747 0,11 24098 0,04 23942 0
  IDH2 c.515G>A chr15:90088606 7294 0,08 16554 0,04 18875 0
  TP53 c.722C>T chr17:7674241 5166 0,12 12609 0,03 13769 0
Indel NPM1 c.860_863dup chr5:171410539 8164 0,11 18630 0,07 17630 0
  JAK2 c.1611_1616del chr9:5070021 12270 0,03 28197 0,02 25411 0
ITD FLT3 ITD300 chr13:28033909 6045  ≥ 0,1 12265 ≥ 0,05 10473 0

 

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